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乙酰丁香酮(As)促进遗传转化的原理

发布时间:2019-10-10 阅读:70

    乙酰丁香酮(AS)的作用原理,是其可诱导农杆菌Vir基因活化,从而促进外源基因的整合。所以zui好让其有一定的诱导时间再转化,效果要好些,而不是加完后直接转化(需要活化)。
    在植物遗传转化中,AS通过诱导农杆菌Vir区基因的活化与表达,T-DNA 的加工与转移,从而使农杆菌T-DNA 更易进入植物基因组并整合到宿主细胞体内。AS是甜菜细胞壁合成的前体物质,但浓度较低,因此在遗传转化中通常需体外加入适当浓度AS以提高转化率。
    乙酰丁香酮的配制方法:
    1、用于拟南芥花侵染的,配制使用的溶剂为DMSO,母液为100mM,使用浓度请参照相关文献。
    2、另外一种是用于愈伤组织的侵染,是用少量甲醇溶解后,再用蒸馏水定容。之后过滤除菌 。显然两者溶剂不一样,不过建议还是使用DMSO。
    目的制备乙酰丁香酮。方法以2,6-二甲氧基苯酚为原料,经酰化、Fries重排反应制得终产物。结果反应总收率63.8%,产物结构由1H-NMR光谱确证。结论该方法原料经济,产率高,生产成本较低,适合工业化生产。
    光照下稳定,组里用农杆菌转染植物时使用乙酰丁香酮,买回来的试剂一般密封4度保存,加DMSO配置溶液后分装到EP管中,负二十度保存。

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